高效色谱仪分析中色谱峰展宽的柱外因素
2021年08月12日 普洱机械设备网
高效色谱仪分析中色谱峰展宽的柱外因素
高效色谱仪分析中色谱峰展宽的柱外因素有进样器、检测器和连接管中的死体积。采用细内径的管路，尽量减小连接管路的长度，采用死体积小的检测器，采用合适的进样方式和技术，可降低柱外效应。一、采用细内径的管路，尽量减小连接管路的长度。若管路内径减小，其长度可增加。若管路内径增大，其长度要缩短。内径0.25mm连接管应为100mm左右或更短。内径0.5mm连接管，长度应在10mm以下。连接管内径减小，管内压力降较大，泵压会上升。二、采用死体积小的检测器。一般检测池内色谱峰展宽小于总的色谱峰展宽的10%时，要求检测池体积小于14μL，一般为5～8μL。三、采用合适的进样方式和技术。进样有时是色谱峰展宽的主要原因，这取决于进样体积和进样方式。进样体积越大，柱外效应越大。进样方式一般有阀进样与注射器进样两种。阀进样允许进样体积大，注射进样允许进样体积小。进样体积还与溶质k值有关，溶质k值越大，允许进样的体积越大。对于GC，由于色谱柱体积占色谱系统总体积的比例很大，柱外效应比较小。而HPLC由于色谱柱体积较小，溶质在液相中扩散系数很低，柱外效应对于色谱峰展宽成为不可忽略的因素，使用细内径色谱柱，考虑柱外效应尤为重要。